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葉綠素a測(cè)定儀的使用方法

發(fā)布時(shí)間:2023-07-07 17:41:20   訪客:175

目前我國內(nèi)陸自然水體的富營養(yǎng)化日益嚴(yán)重,導(dǎo)致水體中的藻類物質(zhì)大量繁殖,由于藻類物質(zhì)中含有葉綠素a,含量較為穩(wěn)定,并且易于人工測(cè)定,因此可以通過使用水質(zhì)葉綠素a測(cè)定儀檢測(cè)水中浮游植物葉綠素a的含量,掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力情況和富營養(yǎng)化水平。

葉綠素a測(cè)定儀的原理

將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類,研磨破碎藻類細(xì)胞,用丙酮溶液提取葉綠素,離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測(cè)定提取液吸光度,根據(jù)公式計(jì)算水中葉綠素a的濃度,可以廣泛適用于海洋監(jiān)測(cè)、自來水、污水處理廠、水文水利、養(yǎng)殖漁業(yè)、大學(xué)和科研研究所,環(huán)保研究機(jī)構(gòu)等。

葉綠素a測(cè)定儀的使用方法(以分光光度法為例)

1、水樣的采集

一般使用有機(jī)玻璃采水器或其他適當(dāng)?shù)牟蓸悠鞑杉嫦?.5m水樣,湖泊、水庫根據(jù)需要可進(jìn)行分層采樣或混合采樣,采樣體積為1L或500ml。如果水樣中含沉降性固體(如泥沙等),應(yīng)將水樣搖勻后倒入2L量筒,避光靜置30min,取水面下5cm水樣,轉(zhuǎn)移至采樣瓶。在每升水樣中加入1ml碳酸鎂懸濁液,以防止酸化引起色素溶解。

2、制備水樣

在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據(jù)水體的營養(yǎng)狀態(tài)確定取樣體積,具體可以參考過濾水樣體積,用量筒量取一定體積的混勻水樣,進(jìn)行過濾,最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。

3、研磨

將樣品濾膜放置于研磨裝置中,加入3ml-4ml丙酮溶液,研磨至糊狀。補(bǔ)加3ml-4ml丙酮溶液,繼續(xù)研磨,并重復(fù)1-2次,保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細(xì)胞提取液轉(zhuǎn)移至玻璃刻度離心管中,用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵,一并轉(zhuǎn)入離心管中,定容至10ml。

4、浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后,用鋁箔包好,放置于4℃避光浸泡提取2h以上,不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3次。

5、離心

將離心管放入離心機(jī),以相對(duì)離心力1000×g(轉(zhuǎn)速 3000 r/min~4000 r/min)離心10min。然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液(試樣)待測(cè)。

6、水樣測(cè)定

將試樣移至比色皿中,以丙酮溶液為參比溶液,葉綠素a測(cè)定儀于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測(cè)量吸光度。750nm波長處的吸光度應(yīng)小于0.005,否則需重新用針式濾器過濾后測(cè)定。最后水樣中葉綠素a的質(zhì)量濃度可以按照相應(yīng)公式進(jìn)行計(jì)算得出。


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